Nos tenemos que enorgullecer porque el pasado martes día 22 de abril se ha defendido la segunda Tesis Doctoral sobre el proyecto de investigación del déficit de factor V. En este caso ha sido el doctorando Juan Andrés de Pablo Moreno el que ha recibido el Título de Doctor, además con mención internacional.
Juan Andrés inició su Tesis Doctoral en este proyecto y se ha formado como un verdadero investigador. Es muy importante esta labor de formar a investigadores que son el relevo generacional para seguir haciendo ciencia que es la clave del progreso de una sociedad. Además, Juan Andrés tiene un gran potencial para ello porque vale para hacer ciencia, algo de lo que poca gente es capaz, pero además porque tiene una gran vocación para ello. Y por si esto fuera poco tiene ese “ingrediente” todavía más difícil, del compromiso de asociacionismo y hacer algo por los pacientes. Enhorabuena para él.
Este interesante y relevante trabajo se ha desarrollado bajo la dirección del Dr. Antonio Liras, el Dr. Luis Revuelta y el Dr. Mariano García-Arranz. Ha sido un trabajo duro e intenso, pero ha merecido la pena.
Ante la necesidad clínica de un tratamiento para el déficit de factor V, en este trabajo de tesis se planteó como objetivo principal desarrollar una terapia génica basada en vectores lentivirales. De este objetivo general se plantearon a su vez tres objetivos específicos: Normalización de la medida de factor V y otros parámetros coagulométricos en ratón; obtención de un modelo animal en ratón viable con deficiencia en factor V y por último la comprobación de que un protocolo de terapia génica pudiera funcionar.
Primero, se realizó una caracterización y normalización detallada de los parámetros coagulométricos (niveles de factor V, tiempo de protrombina y tiempo de tromboplastina parcial activada) en Mus musculus. Se diseñó un protocolo específico para ratones.
El siguiente objetivo fue desarrollar un modelo viable de ratón deficiente en factor V mediante CRISPR/Cas9, que sería muy útil para estudiar tratamientos para el déficit de factor V. Se realizó un estudio in silico para seleccionar una mutación que causara un fenotipo leve equivalente en humanos (Thr1898Met), replicándola en ratones (Thr1857Met) mediante CRISPR (edición génica).
En la descendencia, se observó una herencia mendeliana, sin signos espontáneos de alteraciones en la coagulación. Los niveles de factor V en los animales homocigotos fueron aproximadamente de un 26% que corresponde a un fenotipo leve. Se decidió obtener un fenotipo leve porque uno grave es inviable y los fetos no llegan a nacer.
Y el tercer objetivo fue demostrar la prueba de principio de esta terapia génica utilizando vectores lentivirales.
Reveló resultados muy positivos in vivo en el animal. Se incrementó la actividad coagulante de los ratones homocigotos Thr1857Met y mejoró los tiempos de coagulación.
Esto respalda el potencial de la terapia para prevenir episodios hemorrágicos.
Estudios adicionales en tejidos confirmaron la integración hepática del vector en animales tratados, con expresión de la proteína humana mediante Western blot y aumento de inmunoexpresión en factor V, trombina y αactina de músculo liso.
La investigación aquí presentada no solo contribuye al desarrollo de una terapia efectiva para el déficit de factor V, sino que también subraya el potencial de la terapia génica lentiviral para el tratamiento de otras coagulopatías y enfermedades hereditarias. La evidencia obtenida respalda el uso de esta estrategia terapéutica como alternativa viable a los tratamientos convencionales, con la posibilidad de mejorar sustancialmente la calidad de vida de los pacientes afectados.
Aún con estos esperanzadores resultados, todavía queda camino por andar, sobre todo para optimizar la seguridad del tratamiento para el paciente. Los siguientes pasos incluirán estudios adicionales para optimizar la expresión del factor V y evaluar la estabilidad del efecto terapéutico en el tiempo y su seguridad.
En conclusión, esta Tesis Doctoral presenta un avance significativo en el desarrollo de tratamientos personalizados y duraderos para enfermedades raras y ultra raras, utilizando una terapia génica lentiviral, que ofrece una nueva esperanza para el manejo del déficit de factor V y otras enfermedades de la coagulación poco frecuentes.
