Descripción
El grupo de investigación UCM de Terapias Avanzadas, génica y celular junto con el grupo de Ingeniería Genómica Animal del Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria (INIA), ha obtenido un modelo animal en ratón deficiente en factor V de la coagulación de utilidad en el estudio de fármacos para el tratamiento de las alteraciones de la coagulación producidas por mutaciones en el gen F5 que da lugar al factor V de la coagulación.
El modelo animal se ha protegido mediante patente. La invención se refiere a un modelo animal no humano deficiente en factor V de la coagulación que incluye un cambio de aminoácido en la proteína factor V que reproduce la mutación humana Thr1898Met. La invención incluye mutantes heterocigotos y homocigotos para esta mutación, obteniéndose camadas viables e individuos con signos clínicos leves de la enfermedad que no implican sufrimiento ni riesgos de ser letales.
La invención también se refiere al método que se utiliza para obtener animales, no humanos, deficientes en factor V de la coagulación mediante edición génica (CRISPR) y técnicas de reproducción asistida mediante microinyección en cigotos y, también, al propio modelo animal útil en estudios de fármacos para el tratamiento de la deficiencia de factor V de la coagulación.
¿Cómo funciona?
El modelo animal se ha construido introduciendo en su genoma un transgén del gen F5 con una mutación concreta, y se han conseguido obtener animales homocigotos. Estos animales homocigotos apenas tienen signos clínicos de alteraciones en la coagulación, pero sí se aprecia alargamiento en los tiempos de coagulación como el tiempo de protrombina y el de tromboplastina parcial activada, así como una disminución en los niveles funcionales de factor V.
La mutación que se ha introducido en los animales es la misma que se ha descrito en humanos. Se trata de una mutación puntual en el gen F5 que, en la proteína factor V, da lugar a la sustitución de una treonina por una metionina en el exón 18, dominio A3 de la proteína. Para insertar la mutación en el gen del animal se ha utilizado la tecnología CRISPR/Cas9 mediante técnicas de reproducción asistida con microinyección para obtener los animales modificados.
Ventajas
Hasta ahora, los animales homocigotos descritos para deficiencias en el factor V de la coagulación habían resultado inviables, con camadas que no llegaban a término o animales que morían poco después del nacimiento. Sin embargo, el grupo de investigación ha conseguido obtener animales homocigotos cuyas camadas llegan a término y presentan signos clínicos leves de alteración en la coagulación. La mutación introducida no produce sufrimiento en el animal, puesto que los signos clínicos son leves, pero los mutantes se pueden utilizar como modelo animal en el estudio de fármacos específicos para el tratamiento de la deficiencia en factor V de la coagulación al tener alterados los tiempos de coagulación y los niveles de factor V.
¿Dónde se ha desarrollado?
Este método se ha desarrollado en el seno del Grupo UCM de Terapias Avanzadas, génica y celular cuyo director es el Dr. Antonio Liras, Catedrático de Bioquímica y Biología Molecular de la UCM. En el grupo se llevan a cabo dos líneas generales de investigación, la línea de terapia génica y la línea de terapia celular, pero con un objetivo común que es establecer protocolos basados en esas dos estrategias para el tratamiento de coagulopatías congénitas de origen monogénico, como son la hemofilia A, la hemofilia B y el déficit de factor V de la coagulación.
Y además
La presente invención se encuadra en el sector de las enfermedades relacionadas con la coagulación sanguínea, en concreto con el déficit de factor V, también denominado parahemofilia o enfermedad de Owren. La invención se relaciona con la edición génica y la creación de modelos animales deficientes en factor V para el estudio de tratamientos para este déficit de la coagulación.
Responsable de la investigación
Antonio Liras Martín [aliras@ucm.es]. Departamento de Genética, Fisiología y Microbiología, Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Complutense de Madrid.
Inventores
Antonio Liras Martín, Juan Andrés de Pablo Moreno, Luis Revuelta Rueda, Andrea Miguel Batuecas, Pablo Bermejo Álvarez y Leopoldo González Brusi.
Titulares de la patente
Universidad Complutense de Madrid y el Consejo Superior de Investigaciones Científicas.
